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黃芪中有很多有效成分,比如多糖和黃芪苷。而黃芪苷又分三種,其中生物活性最好的就是黃芪甲苷。根據(jù)藥理研究,黃芪甲苷具有強(qiáng)心減壓,抗疲勞,增強(qiáng)免疫力的作用。常用的檢測方法是高效液相色譜(HPLC)法,利用色譜柱和流動(dòng)相將樣品中溶液的成分分離,在適當(dāng)?shù)臋z測波長上測定峰值。通過對(duì)照品來定量分析,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣品中的黃芪甲苷含量。
根據(jù)2020版《中國藥典》中關(guān)于黃芪甲苷高效液相色譜測定方法,采用C18的色譜柱,以乙腈-水為流動(dòng)相,蒸發(fā)光散射檢測器。理論板數(shù)以黃芪甲苷峰計(jì)算應(yīng)不低于 4000。
取黃芪甲苷對(duì)照品適量,精密稱定,加 80%甲醇制成每 1ml 含 0.5 mg 的溶液,即得。
供試品溶液的制備 取本品粉末(過四號(hào)篩)約 1 g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入含 4%濃氨試液的 80%甲醇溶液(取濃氨試液 4ml,加 80%甲醇至 100ml,搖勻)50ml,密塞,稱定重量,加熱回流 1 小時(shí),放冷,再稱定重量,用含 4%濃氨試液的 80%甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液 25ml,蒸干,殘?jiān)?80%甲醇溶解,轉(zhuǎn)移至 5ml 量瓶中,加 80%甲醇至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。
測定法分別精密吸取對(duì)照品溶液 2μl(或 5μl)、10μl,供試品溶液 10~20μl,注入液相色譜儀,測定,以外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算,即得。本品按干燥品計(jì)算,含黃芪甲苷(C41H68O14)不得少于 0.080%。
除了HPLC法之外,也可以使用其他方法進(jìn)行黃芪甲苷的檢測,比如質(zhì)譜法、紫外光譜法等。