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自然界中的硝酸鹽主要是固氮菌在固氮的時候形成的，也有時候，電閃雷鳴會讓空氣中的氮?dú)夂脱鯕饨Y(jié)合形成氮氧化合物，溶于雨水并和地面上的礦物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)生成硝酸鹽。硝酸鹽可以給植物充足的氮肥，氮元素不僅是氨基酸和蛋白質(zhì)的主要成分，還可以合成葉綠素，促進(jìn)光合作用。因此，如果植物在生長的過程中缺少了氮元素，葉子就會出現(xiàn)變黃枯萎的現(xiàn)象。

檢測植物體內(nèi)的硝酸鹽含量，常用比色法檢測。當(dāng)然，為了更準(zhǔn)確的檢測，也有用到光譜法，色譜法，電化學(xué)法等。

比色法檢測的原理是：在濃酸的條件下，硝酸根離子和水楊酸發(fā)生反應(yīng)，生成硝基水楊酸。生成的硝基水楊酸，在堿性的條件下呈黃色，最大吸收峰波長410nm。在一定的濃度范圍內(nèi)，顏色和含量是呈正比的，就根據(jù)這個線性關(guān)系，采用比色法測定標(biāo)準(zhǔn)曲線。對樣品進(jìn)行處理，并在相同的條件下反應(yīng)并上機(jī)檢測，測定的結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算出植物樣品中的硝酸鹽含量。

因此，這里需要準(zhǔn)備的溶液就有：硝氮-N標(biāo)準(zhǔn)溶液，5%水楊酸-硫酸溶液，8%氫氧化鈉溶液。下面，一個比較關(guān)鍵的步驟就是制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。分別吸取一定量的硝氮-N標(biāo)準(zhǔn)溶液，分7個梯度稀釋定容，制備成10ug/mL，20ug/mL，40ug/mL，60ug/mL，80ug/mL，100ug/mL，120ug/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別吸取以上的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在分光光度計上測定，以0.1mL去離子水做空白對照。每個都加入0.4mL的5%水楊酸-硫酸溶液，搖勻，在室溫下20min，再加入8%NaOH溶液9.5mL，搖勻后冷卻至室溫。在410nm的波長下，測定吸光度。以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線并計算回歸方程。

有了標(biāo)準(zhǔn)曲線，就要對樣品進(jìn)行處理和測定。我們的樣品是植物，將植物組織剪碎混勻，精確稱量2-3g，放入刻度試管中，加入10mL的去離子水，放在沸水浴中提取30min，之后用自來水冷卻，將提取液過濾，定容到25mL的刻度。按照上面標(biāo)準(zhǔn)品處理的過程和步驟，依次加入水楊酸，冷卻，NaOH溶液，并在分光光度計上測定其吸光度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算出樣品中的硝酸鹽含量。