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甜菜色素是從植物甜菜中提取出來的一種天然色素，由甜菜紅素和甜菜黃素組成，甜菜紅素的主要成分是甜菜紅苷。易溶于水，難溶于醋酸、丙二醇，不溶于乙醇、甘油、油脂。甜菜紅苷的較大吸收波長為538nm。甜菜色素易溶于水，在pH4.0-7.0范圍內(nèi)呈紅紫色；pH小于4.0或大于7.0時(shí)，溶液顏色由紅變紫；pH超過10.0時(shí)，溶液會變黃，甜菜紅素會轉(zhuǎn)變成甜菜黃素?？蓮V泛的用在食品，飲料，醫(yī)藥和化妝品等領(lǐng)域。

檢測樣品中的甜菜色素含量，實(shí)驗(yàn)室常用高效液相色譜（HPLC）法，液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）法，分光光度法等。以HPLC為例，簡單的介紹一下檢測流程，僅供參考，如需檢測可以咨詢專業(yè)的檢測結(jié)構(gòu)或權(quán)威文獻(xiàn)資料。

1.樣品處理

用乙醇浸提法進(jìn)行甜菜紅素的提取。先將新鮮的甜菜根清洗干凈，切成一個(gè)一個(gè)的小塊，粉碎，加入乙醇溶液浸泡，再進(jìn)行攪拌，過濾。讓甜菜色素充分的溶解到乙醇中，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器將溶液中的乙醇都蒸發(fā)干凈，就得到了甜菜色素粗提物了。通過層析過濾的方法，將色素和其他雜質(zhì)分離出來，待測。提取過程中，要注意溫度，pH值，提取時(shí)間等細(xì)節(jié)。

2.色譜條件

C18色譜柱，250mmx4.6mm，5um；柱溫：室溫。流動(dòng)相：A甲醇：B2%冰醋酸緩沖液（20:80），流速1ml/min。二極管陣列檢測器或紫外檢測器，波長538nm，進(jìn)樣量10-20uL。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線

用甜菜紅色素的標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶液溶解，梯度稀釋6個(gè)濃度點(diǎn)，在HPLC測出對應(yīng)的色譜峰。對各個(gè)峰面積進(jìn)行積分，對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程，確保在有效的檢測限范圍內(nèi)。確定檢出限，回收率，方法重復(fù)性，精密度等。

4.樣品測定和計(jì)算

記錄了標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰的保留時(shí)間，進(jìn)樣到HPLC測定，識別出樣品的色譜峰，并對它進(jìn)行手動(dòng)或自動(dòng)積分。代入到回歸方程，可以計(jì)算出樣品中的甜菜紅素的含量。